蒙古绵羊Ghrelin基因的克隆和原核表达

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shuxiaopei110

【摘要】

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为了克隆蒙古绵羊Ghrelin基因,构建其原核表达载体,并检测其在大肠杆菌中的表达情况。本研究用RT-PCR方法从蒙古绵羊胃组织mRNA扩增获得Ghrelin基因的cDNA序列,克隆到pMD-19T

【作者】

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梁建荣曹贵方赵鹏伟温世勇程兰玲凃勇

【机构】

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内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室

【出处】

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畜牧兽医学报

【发表日期】

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2011年12期

【关键词】

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GHRELIN 基因克隆原核表达蒙古绵羊 Ghrelin gene cloning prokaryotic expression Mongolia s

【基金项目】

：

内蒙古自然科学基金项目（200711020506）, 国家自然科学基金（30860201）

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为了克隆蒙古绵羊Ghrelin基因,构建其原核表达载体,并检测其在大肠杆菌中的表达情况。本研究用RT-PCR方法从蒙古绵羊胃组织mRNA扩增获得Ghrelin基因的cDNA序列,克隆到pMD-19T载体后进行序列分析。将测序正确的cDNA序列与原核表达载体pET-32a（＋）连接,并转化BL21（DE3）大肠杆菌。经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明克隆的蒙古绵羊Ghrelin基因序列与已发表基因序列有2个碱基的差异,该碱基的变化并不影响氨基酸序列,目的蛋白主要以可

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