目的 探讨尿毒症毒素非对称性二甲基精氨酸(ADMA)致内皮完整性破坏的情况下,血管活性肽apelin - 13对血管平滑肌细胞收缩作用的影响.方法 利用Transwell小室建立单层内皮细胞屏障结构,分别设立实验组和对照组.实验组的内皮细胞经ADMA刺激后,在两组的上室中加入FITC标记的apelin - 13,测出不同时间下室apelin- 13的浓度,计算通透系数Pa值,并通过免疫荧光染色观察内皮细胞形态的变化.随后,利用Transwell小室建立上室内皮细胞、下室平滑肌细胞的双室模型.设立4个实验组:空白对照组、单纯ADMA作用组(ADMA组)、apelin- 13穿越组(apelin组)、ADMA作用后apelin- 13穿越组(ADMA+apelin组).内皮细胞经ADMA刺激后,于上室中加入apelin - 13,分别用免疫荧光及Western印迹法对平滑肌细胞中磷酸化肌球蛋白轻链( p-MLC)进行定性及定量检测.结果 ADMA可改变内皮细胞骨架及细胞间连接的结构,并显著增加单层内皮细胞对apelin- 13的通透性.实验组与对照组的Pa百分比随apelin - 13穿越时间而改变,在20 min时达最大值,与0时间点差异有统计学意义[(176.3±9.2)％比(100.3±1.5)％,P＜ 0.05].在双室模型中,ADMA+apelin组p-MLC表达量最高,与apelin组差异有统计学意义,ADMA组中也有少量p-MLC表达,3组与空白对照组差异均有统计学意义.结论 ADMA可通过影响细胞骨架及细胞间连接,导致单层血管内皮细胞对apelin - 13的通透性增高.apelin- 13穿越损伤的内皮层引起平滑肌p-MLC水平升高,可能参与了尿毒症高血压的发生。