【摘 要】
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介绍了一种新的扩增大片段cDNA序列的方法。采用RT-PCR和基因组PCR相结合的方法,分段扩增基因的编码区,然后再通过重叠延伸PCR拼接出基因的全长序列。虽然在确定基因表达的前
【机 构】
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常熟理工学院/苏州市水稻育种重点实验室
【基金项目】
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江苏省苏州市科技计划(编号:SZS201102、SYN201110).
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介绍了一种新的扩增大片段cDNA序列的方法。采用RT-PCR和基因组PCR相结合的方法,分段扩增基因的编码区,然后再通过重叠延伸PCR拼接出基因的全长序列。虽然在确定基因表达的前提下,也可不通过RT-PCR,直接利用基因组PCR和重叠延伸PCR相结合的方法获得靶基因的全长,但是利用重叠延伸PCR克隆大片段cDNA原理更简单,效率更高,价格更低,因此具有广泛的应用前景。
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