【摘 要】
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在反转录病毒介导的基因治疗研究的过程中,建立了有复制能力的反转录病毒(RCR)的检测系统,包括DNA聚合酶链式反应(PCR)、反转录PCR(RT/PCR)、Southem杂交以及nec基因和β-gal基因的补救分析(Rescueassay)。从DNA水平、RNA水平和病毒活体
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在反转录病毒介导的基因治疗研究的过程中,建立了有复制能力的反转录病毒(RCR)的检测系统,包括DNA聚合酶链式反应(PCR)、反转录PCR(RT/PCR)、Southem杂交以及nec基因和β-gal基因的补救分析(Rescueassay)。从DNA水平、RNA水平和病毒活体水平对野生型病毒进行了灵敏而特异的检测,套式PCR灵敏度达2.5个拷贝,并利用该检测系统检测了血友病B基因治疗和脑胶质瘤基因治疗的靶细胞及有关样品,所有结果均为阴性,没有检测到野生型反转录病毒。为基因治疗临床试验的安全进行奠定了基础。
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