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关键词 莱菔子水溶性生物碱 血压 超氧化物歧化酶 丙二醛
本实验通过观察莱菔子水溶性生物碱对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用以及对大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响，深入探讨莱菔子的作用机理。
资料与方法
药品制备：莱菔子水溶性生物碱。
实验动物：自发性高血压大鼠(SHR)40只，雄性，12周龄，体重265±20g，清洁级。适应性喂养1周后进行实验。
试剂：MDA试剂盒、SOD试剂盒。
主要仪器：RBP-1B型高血压大鼠测压仪；UV-2450型紫外分光光度计；5W-CJ-IF高速冷冻离心机。
实验方法：①莱菔子水溶性生物碱的制备：制备方法参照文献[1]，生莱菔子经水提、70%醇沉，得稠膏状提取物，用稀氨水溶解，氯仿萃取，碱水层用盐酸调至pH值=2~3，滤去不溶物，加雷氏铵盐溶液至沉淀完全，沉淀加少量水洗涤，抽干，用丙酮溶解，过滤，滤液通过中性氧化铝柱，流出丙酮液加饱和硫酸银溶液，滤液减压回收丙酮，析出红棕色结晶，经理化和光谱分析主要为芥子碱硫氰酸盐。②分组及给药：将SHR随机分为5组，空白对照组8只，每日灌服饮用水；高、中、低剂量组各8只，每日分别按45mg/kg、30mg/kg、15mg/kg灌服莱菔子水溶性生物碱(分别相当于生药30g/kg、20g/kg、10g/kg)；卡托普利组8只，每日灌服卡托普利20mg/kg。每只大鼠按10ml/kg给药或水，每周测量1次体重，并且依据体重调整给药剂量。实验期间各组均饲以普通饲料，并自由饮水，给药时间为8周。③血压测定：使用RBP-1B型测压仪测量大鼠尾动脉血压，给药期间每2周测1次血压，每次测3个值，取平均数。④标本采集及检测：给药8周后，于末次给药后将动物禁食12小时，称重，乌拉坦麻醉，腹主动脉取血处死动物，制备血清, 用硫代巴比妥酸(TBA)微量法MDA含量，用黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性。
统计方法：实验数据均采用均数±标准差(X±S)来表示，运用SPSS13.0软件进行计算，组间比较采用方差分析。
结 果
莱菔子水溶性生物碱对SHR血压的影响：治疗8周后，莱菔子水溶性生物碱各剂量组及卡托普利组均明显降低了自发性高血压大鼠的血压，与空白对照组比较有显著性差异(P﹤0.01)。
治疗8周后血压差值比较，莱菔子水溶性生物碱高、中剂量组与卡托普利差异无显著性(P﹥0.05)，低剂量组与卡托普利差异有显著性(P﹤0.01)，结果见表1。
莱菔子水溶性生物碱对SHR血清SOD活性和MDA含量的影响：莱菔子水溶性生物碱各剂量组均能明显降低大鼠血清MDA含量(P﹤0.01)与卡托普利组比较差异有显著性(P﹤0.01)，同时显著升高SOD活性(P﹤0.01)，其中高剂量组与卡托普利组比较差异有显著性(P﹤0.05)结果见表2。
讨 论
莱菔子是十字花科植物萝卜的干燥成熟种子，具有降气化痰，消食除胀之功效。朱丹溪云：“莱菔子治痰有推墙倒壁之功”。莱菔子的有效成分中，芥子碱具有较强的降压作用，芥子碱是广泛存在于十字花科植物中的一种季胺盐物质，对于其盐的形成，有硫氰酸盐和硫酸氢盐两种说法，本实验表明，从莱菔子中直接提取的水溶性生物碱，其主要成分为芥子碱硫氰酸盐，这与谭氏等[3]的文献论述相一致，考虑硫酸氢盐可能为特定提取工艺、精制过程中的次生物。近年来的研究揭示芥子碱是一种非常有价值的天然抗氧化剂，具有清除超氧阴离子自由基和羟自由基的功能和抗衰老的作用[4]。本研究结果证实，以芥子碱为主要成分的莱菔子水溶性生物碱具有明显的降压作用，并能显著提高大鼠血清SOD活性，降低MDA含量，而卡托普利不具有此作用。因此证明莱菔子水溶性生物碱具有抑制脂质过氧化反应，对抗氧自由基损伤的作用。从而有可能保护血管内皮细胞功能，防止脂质过氧化引起的炎性反应，延缓动脉硬化(AS)的发生和发展，防止病情进一步加剧。
现代研究认为，痰证与自由基代谢密切相关，化痰法有利于调节自由基代谢。自由基是体内不断产生、损害自身的病理产物，它又与体内大分子结合，形成过氧化物，后者又作为新的致病因子，引起更广泛的损害。因此与中医痰证理论极其相似，两者都是体内代谢的病理产物，又都可作为新的致病因素，引起多种病变，二者引起的损害作用都具有广泛性和复杂多变性。我们的实验也证明了具有化痰作用的莱菔子能够抑制脂质过氧化反应，对抗氧自由基的损伤，因此我们认为自由基可能是中医学中“痰”的实质。
参考文献
1 王维兰, 朱进, 李钟大，等.莱菔子降压活性成分的研究. 中草药,1987, 18(8) :5
2 谭鹏, 姜虹玉, 吕文海.莱菔子研究概况.实用中医药杂志，2005,21(4):254
3 李群, 顾瑞琦.十字花科植物中的芥子碱对果蝇的抗衰老作用.应用与环境生物学报, 1999, 5(1) :32
本实验通过观察莱菔子水溶性生物碱对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用以及对大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响，深入探讨莱菔子的作用机理。
资料与方法
药品制备：莱菔子水溶性生物碱。
实验动物：自发性高血压大鼠(SHR)40只，雄性，12周龄，体重265±20g，清洁级。适应性喂养1周后进行实验。
试剂：MDA试剂盒、SOD试剂盒。
主要仪器：RBP-1B型高血压大鼠测压仪；UV-2450型紫外分光光度计；5W-CJ-IF高速冷冻离心机。
实验方法：①莱菔子水溶性生物碱的制备：制备方法参照文献[1]，生莱菔子经水提、70%醇沉，得稠膏状提取物，用稀氨水溶解，氯仿萃取，碱水层用盐酸调至pH值=2~3，滤去不溶物，加雷氏铵盐溶液至沉淀完全，沉淀加少量水洗涤，抽干，用丙酮溶解，过滤，滤液通过中性氧化铝柱，流出丙酮液加饱和硫酸银溶液，滤液减压回收丙酮，析出红棕色结晶，经理化和光谱分析主要为芥子碱硫氰酸盐。②分组及给药：将SHR随机分为5组，空白对照组8只，每日灌服饮用水；高、中、低剂量组各8只，每日分别按45mg/kg、30mg/kg、15mg/kg灌服莱菔子水溶性生物碱(分别相当于生药30g/kg、20g/kg、10g/kg)；卡托普利组8只，每日灌服卡托普利20mg/kg。每只大鼠按10ml/kg给药或水，每周测量1次体重，并且依据体重调整给药剂量。实验期间各组均饲以普通饲料，并自由饮水，给药时间为8周。③血压测定：使用RBP-1B型测压仪测量大鼠尾动脉血压，给药期间每2周测1次血压，每次测3个值，取平均数。④标本采集及检测：给药8周后，于末次给药后将动物禁食12小时，称重，乌拉坦麻醉，腹主动脉取血处死动物，制备血清, 用硫代巴比妥酸(TBA)微量法MDA含量，用黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性。
统计方法：实验数据均采用均数±标准差(X±S)来表示，运用SPSS13.0软件进行计算，组间比较采用方差分析。
结 果
莱菔子水溶性生物碱对SHR血压的影响：治疗8周后，莱菔子水溶性生物碱各剂量组及卡托普利组均明显降低了自发性高血压大鼠的血压，与空白对照组比较有显著性差异(P﹤0.01)。
治疗8周后血压差值比较，莱菔子水溶性生物碱高、中剂量组与卡托普利差异无显著性(P﹥0.05)，低剂量组与卡托普利差异有显著性(P﹤0.01)，结果见表1。
莱菔子水溶性生物碱对SHR血清SOD活性和MDA含量的影响：莱菔子水溶性生物碱各剂量组均能明显降低大鼠血清MDA含量(P﹤0.01)与卡托普利组比较差异有显著性(P﹤0.01)，同时显著升高SOD活性(P﹤0.01)，其中高剂量组与卡托普利组比较差异有显著性(P﹤0.05)结果见表2。
讨 论
莱菔子是十字花科植物萝卜的干燥成熟种子，具有降气化痰，消食除胀之功效。朱丹溪云：“莱菔子治痰有推墙倒壁之功”。莱菔子的有效成分中，芥子碱具有较强的降压作用，芥子碱是广泛存在于十字花科植物中的一种季胺盐物质，对于其盐的形成，有硫氰酸盐和硫酸氢盐两种说法，本实验表明，从莱菔子中直接提取的水溶性生物碱，其主要成分为芥子碱硫氰酸盐，这与谭氏等[3]的文献论述相一致，考虑硫酸氢盐可能为特定提取工艺、精制过程中的次生物。近年来的研究揭示芥子碱是一种非常有价值的天然抗氧化剂，具有清除超氧阴离子自由基和羟自由基的功能和抗衰老的作用[4]。本研究结果证实，以芥子碱为主要成分的莱菔子水溶性生物碱具有明显的降压作用，并能显著提高大鼠血清SOD活性，降低MDA含量，而卡托普利不具有此作用。因此证明莱菔子水溶性生物碱具有抑制脂质过氧化反应，对抗氧自由基损伤的作用。从而有可能保护血管内皮细胞功能，防止脂质过氧化引起的炎性反应，延缓动脉硬化(AS)的发生和发展，防止病情进一步加剧。
现代研究认为，痰证与自由基代谢密切相关，化痰法有利于调节自由基代谢。自由基是体内不断产生、损害自身的病理产物，它又与体内大分子结合，形成过氧化物，后者又作为新的致病因子，引起更广泛的损害。因此与中医痰证理论极其相似，两者都是体内代谢的病理产物，又都可作为新的致病因素，引起多种病变，二者引起的损害作用都具有广泛性和复杂多变性。我们的实验也证明了具有化痰作用的莱菔子能够抑制脂质过氧化反应，对抗氧自由基的损伤，因此我们认为自由基可能是中医学中“痰”的实质。
参考文献
1 王维兰, 朱进, 李钟大，等.莱菔子降压活性成分的研究. 中草药,1987, 18(8) :5
2 谭鹏, 姜虹玉, 吕文海.莱菔子研究概况.实用中医药杂志，2005,21(4):254
3 李群, 顾瑞琦.十字花科植物中的芥子碱对果蝇的抗衰老作用.应用与环境生物学报, 1999, 5(1) :32