纳豆糖蛋白的分离纯化、结构表征及其免疫活性研究

来源 :食品科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BLUECAT
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为更充分了解纳豆中的成分对脾细胞增殖能力的影响,本实验通过DEAE-52纤维素离子交换柱层析以及Sephadex G-100凝胶柱层析,从纳豆糖蛋白粗提物中获得两种较纯的纳豆糖蛋白:NPPC-1-b和NPPC-2-a.由高效凝胶渗透色谱得到它们的分子质量分别为26.93、357.60 kD.对这两种糖蛋白进行进一步的红外光谱扫描、紫外光谱扫描、单糖组成分析以及氨基酸组成分析显示,NPPC-1-b中含有的是O-糖肽键,而NPPC-2-a中存在的是N-糖肽键.NPPC-1-b主要由甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖组成,且其含量比例分别为67.45%、25.67%和2.44%.NPPC-2-a主要由葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖以及半乳糖组成,其含量比例分别为36.64%、21.71%、10.35%、9.00%和5.17%.氨基酸自动分析结果显示,两种糖蛋白兼含有人体所需的17种氨基酸.NPPC-1-b主要由谷氨酸、脯氨酸、赖氨酸和精氨酸组成,其含量分别为0.971%、0.791%、0.708%和0.603%;NPPC-2-a主要由谷氨酸、脯氨酸以及天冬氨酸组成,其含量分别为0.903%、0.689%和0.504%.此外,体外免疫活性探讨发现,100~200μg/mL的NPPC-1-b以及12.5~200 μg/mL的NPPC-2-a可显著增强脾细胞增殖能力(P<0.05),其中以100μg/mL的NPPC-2-a作用效果最佳.在细胞因子表达方面,NPPC-1-b和NPPC-2-a可显著促进细胞因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)以及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的表达,其中50μg/mL的NPPC-2-a分泌IL-2最多,200 μg/mL的NPPC-2-a表达IFN-γ的量最高.以上研究结果表明NPPC-1-b和NPPC-2-a具有一定的免疫调节作用.
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