【摘 要】
：
目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培
【机 构】
：
第四军医大学免疫学教研室,第四军医大学西京医院泌尿外科,唐都医院泌尿外科,
论文部分内容阅读
目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培养后,再用逐步降低血清含量的方法将其驯化成用无血清培养基悬浮培养的CHO-S细胞。根据从噬菌体抗体库筛选获得的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体的基因序列,人工设计并合成其重链和轻链基因,分别克隆入真核表达载体pc DNA3.1中,所得载体命名为pc DNA3.1-HC和pc DNA3.1-LC。将构建好的2个载体按照轻、重链比例为3∶1的量用Free Style MAX转染试剂瞬时转染CHO-S细胞,转染7 d后收集培养上清,用SDS-PAGE和Western blot法检测抗体表达情况,用流式细胞术检测其与PSMA阳性细胞的结合活性。结果成功将贴壁CHO细胞驯化成悬浮CHO-S细胞,成功构建了表达抗PSMA人源性抗体重链和轻链基因的真核表达载体,并在CHO-S细胞中实现了抗体的分泌表达,流式细胞术检测证实其可特异性结合PSMA阳性前列腺癌细胞。结论成功驯化获得悬浮CHO-S细胞,驯化后的CHO-S细胞可用于抗体的真核表达,为后续抗体的大量表达纯化及功能研究提供了工具。
其他文献
目的探讨活血寄生汤联合针灸推拿治疗膝骨性关节炎临床疗效的相关研究。方法将2013年5月至2018年5月在我院中医针伤科治疗的94例膝骨性关节炎患者随机分为两组,对照组采用针
一、调研方案和调研结果根据教师职业心理的内涵和民办学校教师的心理特点,我们就教师职业意识、职业心理品质、职业智力技能三大块设计了调研问卷和单项测试卷,进行了大样本
6月初，在中国社会科学院主办的网络媒体论坛专题研讨会上，西班牙专家塞布里昂先生作了主题发言，关于这次研讨会，本刊已经作了全面介绍(详见本刊6月号)，这里，我们把塞布里昂先生会上
第十届（2012）中国畜牧业展览会现场筹备会暨新闻发布会在“六朝古都”——南京召开。中国畜牧业协会沈广秘书长，江苏省畜牧兽医局宋晓春局长、南京国际博览中心张庆碹总经理等领
中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞是重要的表达治疗性糖蛋白的工程细胞。CHO细胞能够生产高质量的生物制剂,与人类拥有相似的翻译后修饰功能。与细菌和酵母表达
由于迟滞具有非光滑多值映射等复杂的非线性特性,使得整个的Hammerstein系统的建模也变得较复杂。系统中的迟滞部分采用PI模型来描述,采用递推最小二乘法来辨识整个Hammerste
随着人们对羽绒服美观性及合体性需求的提高,充绒因素引起的样板缩率成为羽绒服样板尺寸准确性的核心问题。羽绒服工厂实地调研中发现,在实际操作时样板尺寸缩率的计算仍仅依据工人经验,应用简单的绗缝条数计算样板尺寸缩率的问题,没有科学的制版数据依托。因此,解决羽绒服样板尺寸缩率问题,对羽绒服样板尺寸的自动生成及提高生产效率具有重要的现实意义。本文应用正交试验的方法对影响羽绒服蓬起厚度及绗缝缩率的相关充绒因素
土木工程施工中,质量管理是一项专业性和技术性的工作,为了避免质量问题的出现,需要及时分析质量问题的影响因素,并对其进行科学的分析和探讨,在此基础上,有效提高土木工程质
结合中山大学财务制度建设的实际工作,对高校财务制度建设原则、工作办法和应该注意的一些问题做了经验总结
随着汽车电子、信息技术和网络的快速发展,由于网络的开放性,导致出现在互联网等领域的传统信息安全问题渐渐对联网汽车带来威胁,严重的阻碍了传统汽车向智能网联化方向发展