精氨酸升压素对大鼠心肌成纤维细胞诱导型一氧化氮合酶-一氧化氮系统活性的影响

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目的 研究精氨酸升压素(AVP)对大鼠心肌成纤维细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-一氧化氮(NO)系统活性的影响.方法胰酶消化法分离培养Sprague-Dawley仔鼠心肌成纤维细胞,采用硝酸还原酶法、蛋白质印迹和逆转录-聚合酶链式反应观察AVP对心肌成纤维细胞的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOS mRNA表达的影响.结果 (1)不同浓度AVP干预下,心肌成纤维细胞的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOS mRNA表达都随AVP浓度的增高而增加.其中10-7 mol/L AVP组和10-6 mol/L AVP组的NO含量[(69.05±5.56) μmol/L和(62.86±6.05)μmol/L]、iNOS蛋白水平(0.73±0.06和0.64±0.05)和iNOS mRNA表达(0.70±0.03和0.66±0.06)都显著高于对照组[(29.34±5.34) μmol/L, 0.20±0.05, 0.25±0.04]、10-9mol/L AVP组[(31.79±6.59) μmol/L, 0.24±0.07, 0.30±0.06]和10-8 mol/L AVP组[(36.87±7.89) μmol/L, 0.30±0.09, 0.31±0.03].但10-6 mol/L AVP组的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOS mRNA表达都低于10-7 mol/L AVP组.(2)10-7 mol/L AVP干预下CFs的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOS mRNA表达都随培养时间的延长而增加.其中24 h组和36 h组的NO含量[(65.05±5.56) μmol/L和(62.43±6.21) μmol/L]、iNOS蛋白合成(0.69±0.07和0.65±0.05)和iNOS mRNA表达(0.69±0.10和0.68±0.05)都显著高于6 h组[(33.92±4.05) μmol/L, 0.26±0.05, 0.18±0.05]和12 h组[(45.11±4.33) μmol/L, 0.34±0.04, 0.24±0.05],但36 h组的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOS mRNA表达都低于24 h组. 结论 AVP能够增强心肌成纤维细胞的iNOS-NO系统活性,NO合成增加可拮抗AVP的促心脏病理性重塑作用。

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