【摘 要】
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目的 采用免疫亲和层析法纯化制备马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2。方法 破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）免疫马血浆经胃酶消化、加温变性、硫酸铵盐析、明矾吸附、超滤，获得破伤风抗毒素；再经CNBr activated Sepharose 4FF介质偶联TT制成的亲和层析柱纯化，获得马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2。检测其蛋白质含量、分子大小分布、纯度、效价、比活性，并与破伤风抗毒素
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目的 采用免疫亲和层析法纯化制备马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2。方法 破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）免疫马血浆经胃酶消化、加温变性、硫酸铵盐析、明矾吸附、超滤，获得破伤风抗毒素；再经CNBr activated Sepharose 4FF介质偶联TT制成的亲和层析柱纯化，获得马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2。检测其蛋白质含量、分子大小分布、纯度、效价、比活性，并与破伤风抗毒素进行比较。将马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2置（25±2）℃分别保存1、2、3、6个月，测定效价。结果 与破伤风抗毒素比较，马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2的蛋白质含量平均值由45.6 mg/mL下降至20.03 mg/mL，降低了56%;F（ab′）2含量变化较小，聚合物含量由2.92%下降至1.22%，降低了59%；纯度略有降低；效价平均值由2 533 IU/mL升高至3 733 IU/mL，提高了47%；比活性平均值由55 563 IU/g升高至186 277 IU/g，提高了335%。加速稳定性试验6个月，马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2效价及F（ab′）2含量均在合格范围之内。结论 采用免疫亲和层析方法制备了高效价及高比活性的马破伤风免疫球蛋白F（ab′）2，且稳定性良好。
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