目的了解分枝杆菌实验室检测中培养、涂片抗酸染色及PCR-荧光探针法的应用情况与诊断价值。方法回顾2013年1月至2015年12月北京协和医院送检分枝杆菌的10 326份培养、25 269份涂片抗酸染色及5949份PCR-荧光探针法检测的标本种类分布及阳性标本检出率,比较3种检测方法的差异及诊断价值。结果培养法以血液标本数量最多(31.4%),涂片抗酸染色和PCR-荧光探针法均以痰标本数量最多(40.3%和40.4%)。PCR-荧光探针法阳性标本检出率(8.9%)明显高于培养(5.6%)和涂片抗酸染色(1.9%)(P<0.05)。以培养法为金标准,PCR-荧光探针法的敏感度(42.9%)高于涂片抗酸染色法(31.3%),特异度(95.2%)低于涂片抗酸染色法(97.4%)(P均<0.05)。结论 3种分枝杆菌实验室检测方法中,PCR-荧光探针法的阳性标本检出率和敏感度均较高,在实验室分枝杆菌属的检测中具有重要价值。