miR-153-3p调控AEG-1对子宫内膜癌细胞上皮间质转化的机制探究

来源 :云南民族大学学报(自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:superzf
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探讨miR-153-3p调控星形胶质细胞升高基因1(AEG-1)对子宫内膜癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响.收集子宫内膜癌组织及癌旁子宫内膜组织各32例,qRT-PCR法、蛋白印迹(WB)法检测miR-153-3p、AEG-1 mRNA和蛋白表达.体外培养人子宫内膜癌细胞Ishikawa,分为对照组、mimic NC组(转染mimic NC)、miR-153-3p mimic组(转染miR-153-3p mimic)、pcDNA3.1组(转染miR-153-3p mimic、pcDNA3.1)和pcDNA3.1-AEG-1组(转染miR-153-3p mimic、pcDNA3.1-AEG-1),qRT-PCR法检测Ishikawa细胞中miR-153-3p、AEG-1 mRNA表达,流式细胞仪检测Ishikawa细胞凋亡,Transwell法检测Ishikawa细胞侵袭,WB法检测Ishikawa细胞中AEG-1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(Fibronectin)蛋白表达.双荧光素酶实验验证miR-153-3p与AEG-1的靶向作用关系.与癌旁子宫内膜组织相比,子宫内膜癌组织中miR-153-3p水平显著降低(P<0.05),AEG-1 mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05).与mimic NC组相比,miR-153-3p mimic组Ishikawa细胞凋亡率、细胞中miR-153-3p水平及caspase-3、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞侵袭数及细胞中AEG-1 mRNA及AEG-1、MMP-9、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白水平显著降低(P<0.05);与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-AEG-1组Ishikawa细胞凋亡率及细胞中caspase-3、E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞侵袭数、细胞中AEG-1 mRNA及AEG-1、MMP-9、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白水平显著升高(P<0.05).miR-153-3p与AEG-1在Ishikawa细胞中存在靶向关系.miR-153-3p可靶向抑制AEG-1表达,抑制Ishikawa细胞EMT、侵袭行为,并诱导细胞凋亡.
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