假丝酵母SSR-PCR反应体系的优化

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nianlanzhen

【摘要】

：

目的建立假丝酵母SSR-PCR反应体系,确立最佳反应条件,为将该技术用于临床假丝酵母感染的快速鉴定奠定基础。方法根据引物Tm值设立退火温度梯度,确定适宜的退火温度。利用正交

【作者】

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孙晓红杨艳秋贺丹张云峰横山耕治王丽

【机构】

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吉林大学白求恩医学院病原生物学系,北华大学基础医学院,吉林大学第一医院,日本千叶大学真菌医学研究中心

【出处】

：

中国实验诊断学

【发表日期】

：

2011年1期

【关键词】

：

假丝酵母微卫星聚合酶链反应正交实验 Candida SSR PCR Orthogonal Design

【基金项目】

：

国家自然科学基金重大国际合作资助项目（30910103903）, 吉林省科技发展计划重点资助项目（20080444-2）

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目的建立假丝酵母SSR-PCR反应体系,确立最佳反应条件,为将该技术用于临床假丝酵母感染的快速鉴定奠定基础。方法根据引物Tm值设立退火温度梯度,确定适宜的退火温度。利用正交实验,对影响SSR-PCR反应体系的Taq DNA聚合酶、模板DNA、dNTP、引物等4种主要因素,进行优化。结果引物最适退火温度为51℃。假丝酵母最佳的SSR-PCR反应体系为：在25μl的PCR反应体系中加入Taq DNA聚合酶1.0 U、模板DNA为25 ng、dNTP为0.15 mmol.L-1、引物为0.5μmol.L-1。结

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