【摘 要】
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目的为研究犬新孢子虫烯醇化酶(ENO1)的生物学功能,对ENO1进行原核表达,蛋白纯化后进行抗原性鉴定和亚细胞定位。方法根据GenBank公布的犬新孢子虫ENO1序列设计引物,以犬新孢子虫速殖子cDNA为模板,PCR扩增ENO1基因。将ENO1基因片段与原核表达载体pGEX-4T-1连接,连接产物转入表达感受态细胞Rosetta DE3a,经IPTG诱导表达ENO1并进行SDS-PAGE分析。重组蛋白经纯化后免疫小鼠,制备多克隆抗体,ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定其反应原性,通过间接
【机 构】
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九江学院基础医学院,吉林大学动物医学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.31902296),石家庄市科学技术研究与发展计划项目(No.191500283A)。
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目的为研究犬新孢子虫烯醇化酶(ENO1)的生物学功能,对ENO1进行原核表达,蛋白纯化后进行抗原性鉴定和亚细胞定位。方法根据GenBank公布的犬新孢子虫ENO1序列设计引物,以犬新孢子虫速殖子cDNA为模板,PCR扩增ENO1基因。将ENO1基因片段与原核表达载体pGEX-4T-1连接,连接产物转入表达感受态细胞Rosetta DE3a,经IPTG诱导表达ENO1并进行SDS-PAGE分析。重组蛋白经纯化后免疫小鼠,制备多克隆抗体,ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定其反应原性,通过间接
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