油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析

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利用基因重组技术,以油松PAL基因(TaPAL)CDS区(2157bp)作为外源基因的同源重组片段,构建了pET-28a—TaPAL重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达并进行分析。经SDS—PAGE电泳检测,在分子量80KD处获得一条特异蛋白的表达条带,且其大小与预期相符。在温度28℃,IPTG浓度1.5mm01.L-1,时间3h条件下,重组质粒的表达量最大。可溶性分析表明,在最佳诱导条件下,该蛋白主要以包涵体形式存在。粗酶活性测定表明,粗酶(在20℃、IPTG浓度1mm01.L。条件下诱
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