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目的：了解耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌临床分离株rrs与rpsl基因突变特征及其与耐药的关系。方法对136株活动性肺结核患者痰标本分离的结核分枝杆菌进行菌型鉴定及结核分枝杆菌药敏试验，提取耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌DNA，应用PCR扩增rrs和rpsl目的片段，并进行测序、比对验证。结果从136株临床结核分枝杆菌中筛选出耐二线氨基糖苷类菌株25株（18.3%，25/136），其中耐卷曲霉素13株（9.56%，13/136）、耐卡那霉素9株（6.62%，9/136）、耐卷曲霉素和卡那霉素2株（1.47%，