【摘 要】
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为探讨密码子优化的(GGGGS)_3对重组人血清白蛋白在毕赤酵母中表达的影响,分别用PCR的方法扩增出hsa和hsa-(ggggs)_3,经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后与BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切的pPIC9K连接
【机 构】
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东南大学附属中大医院检验科,安徽安科生物工程(集团)股份有限公司
【基金项目】
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青年科学基金项目(81200877)
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为探讨密码子优化的(GGGGS)_3对重组人血清白蛋白在毕赤酵母中表达的影响,分别用PCR的方法扩增出hsa和hsa-(ggggs)_3,经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后与BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切的pPIC9K连接,构建成pPIC9KHSA与pPIC9K-HSA-(GGGGS)_3重组分泌表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH-5α后,表达载体分别用SalⅠ线性化后电击转化至毕赤酵母SMD1168感受态细胞中,将阳性转化子进行PCR鉴定并用甲醇诱导表达。SDS-PAGE分析表明HSA-(GGGGS)_3
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