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建立了QuEChERS结合液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测鱼肉中两种硝基咪唑类药物和一种硝基咪唑代谢产物的分析方法,重点考察了样品提取溶剂和二氧化锆使用量对回收率的影响。前处理最佳条件为:采用乙酸铵、0.1%氨水-乙腈振荡提取,经100mgPSA、40mgC18、600mg无水硫酸镁及20mg二氧化锆净化剂净化;液质最佳条件为:0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈梯度洗脱,C18色谱柱（2.1mm×50mm）分离,正离子模式电喷雾电离,多反应离子扫描（MRM）分析目标化合物。三种药物在0.5～20ng/mL范围内线性良好,R2≥0.998;3个添加水平（n=6）,平均回收率在88.1%～107%范围内,相对标准偏差在2.43%～8.17%范围内;检出限在0.2～0.5μg/kg之间,定量限在0.6～1.2μg/kg之间。结论:该方法可有效的降低基质效应,提高分析方法的选择性及灵敏度,可用于鱼肉的硝基咪唑类药物的检测。