用三种逆转录PCR扩增系统检测丙型肝炎病毒RNA的比较

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目的:比较常用的三种(MMLV/Taq,AMV/Taq和Tth单酶)逆转录PCR扩增系统的效果。方法:利用这三个系统对丙型肝炎病毒不同稀释度RNA进行逆转录PCR扩增,比较其检测灵敏度。结果:AMV/Taq系统最佳,MMLV/Taq系统次之,Tth单酶系统最差,AMV/Taq系统的检测灵敏度比Trh单酶系统高10000倍,比MMLV/Taq系统高100倍。结论:建议使用AMV/Taq酶的逆转录PCR扩增系统以提高丙型肝炎病毒的检测灵敏度,减少假阴性的出现。 OBJECTIVE: To compare the efficacy of three commonly used (MMLV / Taq, AMV / Taq and Tth single enzyme) reverse transcription PCR amplification systems. Methods: The three systems were used to amplify different dilution RNA of hepatitis C virus by reverse transcription PCR. The sensitivity of detection was compared. Results: AMV / Taq system was the best, followed by MMLV / Taq system, Tth single enzyme system was the worst. The detection sensitivity of AMV / Taq system was 10000 times higher than Trh single enzyme system and 100 times higher than MMLV / Taq system. Conclusion: It is recommended to use AMV / Taq polymerase reverse transcription PCR amplification system to improve the detection sensitivity of hepatitis C virus and reduce the occurrence of false negatives.
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