【摘 要】
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目的 本研究通过单独和联合使用9-顺式维甲酸(9-cis retinoic acid,9-cis RA)和1α,25二羟维生素D3 [1 alpha,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2 D3],观察其对神经母细胞瘤(
【机 构】
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安徽医科大学附属省立医院小儿外科,合肥,230001
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目的 本研究通过单独和联合使用9-顺式维甲酸(9-cis retinoic acid,9-cis RA)和1α,25二羟维生素D3 [1 alpha,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2 D3],观察其对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞系生长、分化、凋亡的影响,探讨其协同作用的效果及相关机制.方法 将NB SKN-SH细胞分为A(对照组)、B(9-cis RA用药组)、C(1,25(OH)2 D3用药组),D(9-cis RA和1,25(OH)2 D3联合用药组)四组,在处理后适当的时间用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞抑制率,倒差显微镜观察细胞形态的改变,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡的变化,同时用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测维甲酸受体β(retinoic acid receptor beta,RARβ)的mRNA表达情况.结果 单独使用9-cis RA或1,25(OH)2 D3和联合用药的细胞生长均受到抑制,并呈时间依赖关系,其中联合用药组抑制率明显高于单独用药组(P＜0.05),形态学分化明显,MTT法测定显示联合用药能显著提高NB细胞抑制率并明显优于单独用药组(P＜0.05),FCM钙依赖性磷脂结合蛋白V和7-氨基放线菌素D(Annexin V/7-AAD)染色法检测显示联合用药对诱导NB细胞早期凋亡和坏死具有显著的协同作用,RT-PCR检测发现联合用药组RA即的mRNA表达明显高于其他组.结论 9-cisRA联合1,25(OH)2 D3在体外对NB SK-N-SH细胞系的生长抑制、分化、凋亡能产生明显的协同抑制作用,在小剂量的情况下即能起到显著的治疗效果,明显优于其单独用药,其协同作用的机制可能为通过增加RARβ的mRNA表达水平来抑制肿瘤的生长,为其联合应用于临床提供理论依据和指导.
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