【摘 要】
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为建立一种用于快速检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的逆转录环介导等温扩增技术(RTLAMP)方法,设计了针对VP1基因保守序列的5组引物,采用荧光检测试剂通过实时浊度仪监测阳性
【机 构】
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广西民族大学海洋与生物技术学院广西高校微生物与植物资源利用重点实验室; 广西大学养禽与禽病研究所; 广西民族大学广西多糖材料与改性重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31560706,31660717);广西科技重大专项(桂科AA17204057);广西自然科学基金项目(2017GXNSFAA198033,2014GXNSFDA118018);2014广西民族大学相思湖青年学者创新团队项目(2014);广西民族大学2018年研究生教育创新计划项目(gxun-chxzs2018066)
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为建立一种用于快速检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的逆转录环介导等温扩增技术(RTLAMP)方法,设计了针对VP1基因保守序列的5组引物,采用荧光检测试剂通过实时浊度仪监测阳性扩增结果。结果显示,从5组引物中筛选出了1组对IBDV有效扩增的引物,利用该引物能够在63℃、1 h条件下实现IBDV VP1基因片段的特异性扩增,与其他病毒的核酸无扩增反应;样品RNA的最低检出量为5×10-5ng/L;利用建立的检测方法对14份临床样品进行检测,其阳性检出率为100%。结果表明,建立的IBDV RT-LAMP检测方法具有快速、准确、特异性强、灵敏度高和便捷的特点,可用于IBD临床样品的检测。
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