论文部分内容阅读
目的探讨在小鼠缺血性脑卒中模型中,磷脂酶D1（PLD1）在自噬和神经损伤中的作用。方法将6只68周龄成年雄性C57鼠采用随机数字表法分为两组,sham组和stroke组,每组各3只。sham组小鼠给予缺血性脑卒中处理但不进行大脑中动脉结扎,stroke组小鼠给予缺血性脑卒中处理。观察两组小鼠脑神经元内PLD1的变化。然后构建条件性基因敲除小鼠,将小鼠采用随机数字表法分为3组:sham PLD1fl/fl组12只,缺血性脑卒中后PLD1fl/fl组(stroke PLD1fl/fl组) 12只,缺血性脑卒中后PLD1-KO组（stroke PLD1-KO组） 12只,然后利用免疫荧光染色、Western blotting、TTC染色法观察sham PLD1fl/fl组小鼠,缺血性脑卒中后PLD1fl/fl小鼠和缺血性脑卒中后PLD1-KO小鼠神经元自噬（LC3-Ⅱ）的情况及自噬对梗死面积的影响,明确PLD1的作用机制。结果在缺血性脑卒中后24 h,缺血半暗带的神经元中,stroke组较sham组PLD1表达明显增多。在条件性敲除小鼠中,stroke PLD1fl/fl组较sham PLD1fl/fl组自噬重要标志物LC3-Ⅱ明显升高（P <0. 05）,而条件性敲除神经元内PLD1后,stroke PLD1-KO组较stroke PLD1fl/fl组LC3-Ⅱ明显降低（P <0. 05）,同时,梗死面积也明显缩小（P <0. 000 1）。结论缺血性脑卒中后神经元内PLD1表达升高,LC3-Ⅱ增多,抑制PLD1引起的过度自噬可以有效改善缺血性脑卒中后的神经损伤。