斜带石斑鱼IgZ重链基因的表达纯化和抗体制备

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为获得斜带石斑鱼IgZ重链基因的多克隆抗体,成功构建了斜带石斑鱼免疫球蛋白IgZ重链重组蛋白表达质粒pQE30/IgZ,将其转化到大肠杆菌表达菌株M15中,确定了最佳诱导表达条件:IPTG0.2mmol/L,诱导温度30℃,诱导时间6h。所获得的IgZ重链重组蛋白经Ni-NTA亲和层析后,纯度达到85%1~上;以纯化的IgZ重链重组蛋白为抗原免疫新西兰兔,制备出相应的多克隆抗体,经ELISA测定抗血清效价约为1:320000。
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