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目的
观察嘌呤霉素(PAN)对足细胞α-辅肌动蛋白4(α-actin-4)mRNA表达和分布的影响，探讨α-actin-4与足细胞损伤的关系。
方法将体外培养肾小球足细胞系(MPC5)随机分为实验组与对照组。实验组采用PAN刺激(剂量为50 mg/L)，分别于8 h、24 h和48 h观察细胞形态，提取总RNA和细胞免疫组织化学观察α-actin-4的分布。对照组用100 mL/L FBS的RPMI 1640培养液培养。应用Image J图像软件处理细胞图像，计算2组随机选择的30个细胞在上述3个时间点200倍镜下的细胞相对面积，实时定量荧光聚合酶链反应(RT-PCR)和间接免疫荧光法检测α-actin-4 mRNA表达和分布变化。
结果对照组足细胞生长情况良好，胞体呈不规则星形，与增殖状态足细胞比较，细胞体和细胞核均显著增大，自胞体伸出树枝样突起，相邻细胞间足突相互连接。实验组细胞胞体缩小，足突回缩、消失，细胞间失去相互连接。2组间α-actin-4 mRNA各时间点表达比较，8 h差异无统计学意义(P>0.05)，24 h、48 h差异有统计学意义(P均<0.01)，实验组在24 h、48 h后α-actin-4 mRNA表达升高。对照组α-actin-4在胞质内呈细丝状均匀分布，在足突中呈放射状分布；8 h后在实验组α-actin-4压力丝纤维变短，排列紊乱，PAN刺激24 h后细胞质中α-actin-4分布明显减少，刺激48 h后出现细胞质分布缺失。
结论α-actin-4表达分布的异常与PAN损伤足细胞的时间呈正相关，α-actin-4是足细胞损伤机制中的一个重要分子。