【摘 要】
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目的:探讨微小RNA-128-3p(miR-128-3p)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:培养人子宫内膜血管内皮细胞hEEC和EC细胞系HEC-1A、Ishikawa和AN3CA,RT-qPCR检
【机 构】
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郑州大学第二附属医院妇产科,郑州450014;济南市妇幼保健院妇科,济南250001
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目的:探讨微小RNA-128-3p(miR-128-3p)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:培养人子宫内膜血管内皮细胞hEEC和EC细胞系HEC-1A、Ishikawa和AN3CA,RT-qPCR检测细胞中miR-128-3p和Notch1 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞中Notch1蛋白水平.转染miR-128-3p模拟物或Notch1小干扰RNA至Ishikawa细胞,构建过表达miR-128-3p或低表达Notch1的Ishikawa细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞术、Western blot分别检测过表达miR-128-3p或低表达Notch1对Ishikawa细胞增殖、凋亡及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-cas-pase-3)和β-连接素(β-catenin)蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证Ishikawa细胞中miR-128-3p与Notch1调控关系.结果:与hEEC细胞比较,EC细胞系HEC-1A、Ishikawa和AN3CA中miR-128-3p表达水平降低(P<0.05),Notch1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).过表达miR-128-3p或低表达Notch1后,Ishikawa细胞存活率和cyclinD1蛋白水平降低(P<0.05),细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05).miR-128-3p在Ishikawa细胞中靶向负调控Notch1表达.过表达Notch1可逆转过表达miR-128-3p对Ishikawa细胞存活率、凋亡率及cyclinD1和cleaved-caspase-3蛋白表达的影响.过表达miR-128-3p可降低Ishikawa细胞中β-catenin蛋白表达,而过表达Notch1可逆转过表达miR-128-3p对Ishikawa细胞β-catenin蛋白表达的影响.结论:过表达miR-128-3p可抑制EC细胞增殖,并促进细胞凋亡,其可能通过抑制Notch1表达和Wnt/β-catenin信号通路发挥作用.
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