NR5A2减弱雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞的炎性反应

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目的探讨NR5A2对大鼠胰腺腺泡细胞系AR42J炎性反应的影响。方法用雨蛙素刺激AR42J细胞,建立胰腺炎细胞模型。分别用慢病毒和sh-RNA感染AR42J细胞,上调和下调细胞内的NR5A2,用Western blot检测NR5A2的含量。在此基础上,用流式细胞计量术检测细胞凋亡率,用ELISA检测细胞培养上清中炎性因子IL-1、TNF-α的水平。结果用100 nmol/L雨蛙素刺激AR42J细胞,成功诱导炎性反应和细胞凋亡,刺激6 h凋亡率达到峰值;刺激24 h NR5A2含量降到最低点,刺激48 h基本恢复至正常水平。用慢病毒载体过表达NR5A2,再用雨蛙素刺激,过表达组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);IL-1和TNF-α在过表达组均显著降低(P<0.01,P<0.05)。用shRNA沉默NR5A2,雨蛙素刺激后沉默组的细胞凋亡率显著低于对照组(P<0.05);IL-1和TNF-α在沉默组均显著升高(P<0.05,P<0.01)。在过表达NR5A2基础上沉默β-catenin,与对照组相比,凋亡率降低(P<0.05),IL-1和TNF-α显著增高(P<0.05,P<0.01)。结论 NR5A2能够促进炎性反应条件下胰腺腺泡细胞的凋亡,抑制炎性反应。β-catenin参与NR5A2在腺泡细胞炎性反应应激条件下的调节作用。
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