【摘 要】
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组蛋白乙酰化修饰是一种最先被确定的、广泛参与调控哺乳动物早期胚胎发育的转录后修饰.组蛋白H3上赖氨酸第64位乙酰化(H3K64ac)是组蛋白八聚体侧表面的、一种先前未被鉴定出
【机 构】
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安徽农业大学动物科技学院/地方畜禽遗传资源保护与生物育种安徽省重点实验室,合肥230036
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组蛋白乙酰化修饰是一种最先被确定的、广泛参与调控哺乳动物早期胚胎发育的转录后修饰.组蛋白H3上赖氨酸第64位乙酰化(H3K64ac)是组蛋白八聚体侧表面的、一种先前未被鉴定出来的组蛋白修饰,己知其可参与调控核小体的稳定性和促进体内基因的表达.目前关于H3K64ac在猪(Sus scrofa domesticus)体细胞核移植胚胎早期发育过程中的作用尚未知.本研究利用免疫荧光染色技术,检测孤雌激活(parthenogenetic activation,PA)胚胎和体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)胚胎各发育阶段的H3K64ac水平,再分别使用阿非迪霉素、鹅膏蕈碱和放线菌酮处理PA4-细胞胚胎.结果表明,H3K64ac在PA和SCNT胚胎中均存在,且H3K64ac水平在原核期最高,2-细胞期降低,4-细胞期略有回升,8-细胞至囊胚期H3K64ac处于低水平状态;比较两种类型胚胎的H3K64ac水平发现,各阶段SCNT胚胎的H3K64ac水平均显著高于PA胚胎(P＜0.05);抑制DNA复制、RRNA和蛋白质合成没有影响胚胎内H3K64ac水平.结果提示,猪SCNT胚胎早期发育中H3K64ac发生异常的重编程,且猪早期胚胎发育中H3K64ac水平的降低是不依赖于DNA复制、RRNA和蛋白质合成的主动反应过程.本研究为进一步探究H3K64ac参与调控猪体细胞核移植胚胎发育过程中分子机制研究提供理论依据.
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