鹅胆固醇7α-羟化酶基因克隆及原核表达

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laopengyou123
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为进一步研究胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)在胆汁酸合成和胆固醇代谢过程中的调节机制,采用RT-PCR和RACE方法从鹅(Anser anser)肝组织克隆CYP7A1基因全长cDNA序列,亚克隆其CDS区并构建原核表达载体pET-28a-cyp7α1。重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达。经His-Bind纯化试剂盒纯化的His-CYP7A1免疫Bal b/c小鼠,制备小鼠抗鹅CYP7A1多克隆抗体,Western blotting验证His-CYP7A1免疫原性和抗体的特异性
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