论文部分内容阅读
目的 观察中医经典名方安寐丹对睡眠剥夺(Sleep disruption,SD)模型大鼠食欲素(Orexin)及其介导的食欲素A(Orexin A,OXA)/cAMP反应元件结合蛋白(cAMP Response Element Binding Protein,CREB)/Period1(period circadian regulator 1,PER1)基因信号通路的作用.方法 40只雄性6月龄SD大鼠随机等分为空白组、模型组、艾司唑仑组、安寐丹组,空白组常规进食进水,其他三组采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法构建SD模型,自主活动仪监测昼夜活动节律.空白组、模型组给予等容的0.9％氯化钠灌胃,艾司唑仑组给予艾司唑仑0.09 mg·kg-1、安寐丹组给予安寐丹水煎剂9.09 mg·kg-1灌胃治疗,连续4周.4周后运用Morris水迷宫检测其学习记忆,免疫荧光检测下丘脑Orexin神经元表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠下丘脑组织OXA、食欲素B(Orexin B,OXB)含量,蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)和实时荧光定量(Quantitative Real-time PCR,RT-PCR)检测各组大鼠下丘脑组织OXA/CREB/PER1信号通路蛋白和mRNA表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠24 h自主活动时间和活动距离均高于空白组;活动时间、活动距离显著增加(P<0.01),上平台潜伏期与游泳总路程显著延长(P<0.01),穿越站台次数和站台活动时间均减少(P<0.01);下丘脑组织OXA、OXB含量高于空白组(P<0.01);且OXA、CREB蛋白和mRNA表达均显著升高(P<0.01),PER1蛋白和mRNA表达均显著下调(P<0.01).与模型组比较,安寐丹组大鼠上平台潜伏期缩短(P<0.01)、游泳总路程减少(P<0.05)、穿越平台数量增加(P<0.05);下丘脑组织OXA、OXB含量降低(P<0.05),OXA蛋白表达下调(P<0.05)、CREB蛋白表达下调(P<0.01)、PER1蛋白表达上调(P<0.01),OXA和CREB mRNA表达降低(P<0.05),PER1 mRNA表达升高(P<0.05).结论 安寐丹改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱可能与调节Orexin及其介导的OXA/CREB/PER1信号通路相关.