【摘 要】
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目的从肠道菌群角度,应用PCR克隆结合测序技术以及定量PCR技术,比较2型糖尿病人群与血糖正常人群肠道菌种及数量的差异,为2型糖尿病的发病机制提供新线索。方法选取2014年8月
【机 构】
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浙江省杭州市萧山区第一人民医院检验科,
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目的从肠道菌群角度,应用PCR克隆结合测序技术以及定量PCR技术,比较2型糖尿病人群与血糖正常人群肠道菌种及数量的差异,为2型糖尿病的发病机制提供新线索。方法选取2014年8月—10月在萧山区第一人民医院住院及门诊随诊的2型糖尿病患者10人,同时选取10名健康对照者,收集研究对象当日粪便样品,提取其中细菌基因组DNA,采用细菌通用扩增引物分别进行PCR扩增后进行克隆,每个样本挑取30个阳性克隆进行测序分析,测序结果与数据库比对进行菌种鉴定,并对拟杆菌、普雷沃氏菌以及双歧杆菌属细菌进行定量PCR,比较2型糖尿病患者与正常人菌种及数量差异。应用两独立样本t检验及两独立样本非参数检验方法中的Mann-Whitney U检验比较组间差异。结果拟杆菌门和厚壁菌门在2型糖尿病患者和健康人中均为主要的优势菌种,与健康人组相比,2型糖尿病组中拟杆菌属(12.25±0.51,3.29±0.60)与双歧杆菌属细菌(9.13±0.75,2.06±0.31)显著增加(P<0.05),而普雷沃氏菌在糖尿病人中(3.43±1.04)则显著低于健康人群(11.16±0.45),P<0.05。结论 2型糖尿病患者肠道菌群与健康人群相比存在一定的差异,通过分析肠道菌群构成的方法来判断糖尿病的风险具有一定的可行性,通过比较菌群差异可为2型糖尿病高危人群的判断提供新线索。
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