35S驱动Pib基因启动区和编码区的转基因初步分析

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将包含Pib基因启动区及下游完整编码区的9.9kbDNA片段克隆到双元载体pPZP2Ha3(+)中,构建了35S驱动的正义表达载体pNAR701(20.3kb);同时将Pib基因编码区6986~9392bp之间的DNA片段,克隆到双元载体pPZP2Ha3(-)中,构建了35S驱动的反义表达载体pNAR703(12.8kb);用农杆菌介导法转入中感稻瘟病水稻品种R109中。PCR、Southern blot鉴定以及转基因T0代种子的潮霉素抗性鉴定证明,目的基因已经整合到R109基因组中,并能在后代稳定遗传。
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