【摘 要】
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目的 为早期诊断和有效预防心脏移植排斥反应,研究在细胞水平用心肌NAD(P)H荧光成分分析监测排斥反应的可行性.方法 用NAD(P)H荧光标记监测线粒体功能,从14例儿童心脏移植患
【机 构】
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北京大学深圳医院,蒙特利尔大学儿科学部,蒙特利尔大学圣-贾斯汀医院心脏中心
【基金项目】
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加拿大创新基金;魁北克卫生研究基金
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目的 为早期诊断和有效预防心脏移植排斥反应,研究在细胞水平用心肌NAD(P)H荧光成分分析监测排斥反应的可行性.方法 用NAD(P)H荧光标记监测线粒体功能,从14例儿童心脏移植患者心内膜活检组织中分离活体心肌细胞和大鼠(n=5, 13～14周龄)心肌细胞,光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)记录375 nm紫外激光激发的心肌自发荧光(AF)光谱和荧光寿命.将鼠心肌细胞分为4组,无缺氧对照组,无缺氧鱼藤酮组,缺血对照组和缺血鱼藤酮组; 对比无排斥反应(R0)人心肌细胞,无缺氧鼠细胞和缺血鼠细胞间, R0人心肌细胞和轻度排斥反应(R1)间的AF动力学变化.结果 成功分离并测定了人心肌细胞AF光谱,在420～560 nm光谱区域,至少存在0.5～0.7 ns,1.9～2.4 ns和9.0～15.0 ns 3个AF寿命池.与无缺氧对照组比较,缺血对照组鼠心肌细胞荧光强度明显增强(P0.05).R0组人心肌细胞AF强度显著弱于无缺氧对照组鼠心肌细胞(P
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