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探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)在肝卵圆细胞增殖过程中的效应、影响因素及作用机制。
方法流式细胞术检测大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞表面趋化性细胞受体因子4(CXCR4)的表达情况。Western blot法检测细胞中β连环素蛋白磷酸化水平。激光共聚焦显微镜观察细胞内β连环素的分布情况。荧光定量PCR检测经典Wnt通路下游基因Ccnd1、c-Myc的表达。将细胞分为对照组、SDF-1组、转化生长因子β1(TGF-β1)组、SDF-1+TGF-β1组、SDF-1+TGF-β1+CXCR4抑制剂组,噻唑蓝法检测各组细胞增殖情况。
结果WB-F344细胞中CXCR4的表达量很低,而TGF-β1可上调WB-F344细胞CXCR4的表达(CXCR4阳性率上升39.5%)。SDF-1结合于CXCR4后可促进肝卵圆细胞中β连环素磷酸化,抑制β连环素入核,下调下游基因Ccnd1、c-Myc的表达。200 μg/L的SDF-1单独作用72 h后WB-F344细胞的增殖情况(0.512±0.010)与对照组(0.513±0.008)相比差异无统计学意义(t=0.337,P>0.05),5 μg/L的TGF-β1可轻度抑制其增殖(0.393±0.007,t=28.001,P<0.05),而SDF-1+TGF-β1组WB-F344细胞增殖能力较TGF-β1组进一步减弱(0.272±0.009,t=32.204,P<0.05)。
结论TGF-β1可上调肝卵圆细胞中CXCR4的表达,协同SDF-1通过调控β连环素的功能状态,抑制肝卵圆细胞体外增殖。