His-猪生长激素融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化

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将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA克隆入大肠杆菌表达载体pET-28a(+),构建出能利用Ni-NTA Agarose柱一步纯化表达产物的重组质粒pPGH020.探讨了大肠杆菌中重组猪生长激素的最佳表达条件和纯化方法,制备并纯化了兔抗pGH抗体.SDS-PAGE和Western blot的分析结果表明,26.5 kD处有包括His·Taq、thrombin位点序列和pGH序列的融合蛋白特异条带.凝胶扫描估测猪生长激素的表达量占大肠杆菌胞浆蛋白的17.3%左右.
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