B7-H1慢病毒的制备及其在B16F10细胞中的表达鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xsnxj111

【摘要】

：

目的构建小鼠B7-H1分子慢病毒表达载体并包装成感染性病毒颗粒，获得稳定表达B7-H1的B16F10细胞。方法以小鼠B7-H1的测序质粒为模板，PCR扩增B-1H1全长，装入pLenti6／V5-D-TOPO慢

【作者】

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张立群段文元许雪青黄钢陈雪丹白云

【机构】

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第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室

【出处】

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第三军医大学学报

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

：

B7-H1 慢病毒基因治疗 B7-H1 lentivirol gene therapy

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30271246）

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目的构建小鼠B7-H1分子慢病毒表达载体并包装成感染性病毒颗粒，获得稳定表达B7-H1的B16F10细胞。方法以小鼠B7-H1的测序质粒为模板，PCR扩增B-1H1全长，装入pLenti6／V5-D-TOPO慢病毒表达载体，经过测序证实其序列与标准序列完全一致。将B7-H1表达载体用Lipofectamine^TM2000转染293FT细胞，包装成感染性病毒颗粒，感染B16F10细胞后，加入含Blasticidin（终浓度为4．0μg／m1）的RPMI1640培养基，筛选出稳定表达B7-H1蛋白的B1

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