全细胞催化剂pelB-Xln-DT构建及其在水解三七皂苷R1中的应用

来源 :林业工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zibzibzib

【摘要】

：

设计带有EcoRV和XhoI酶切位点的上下游引物PCR扩增嗜热菌Dictyoglomus thermophilum DSM 3960的GH39家族的β-木糖苷酶Xln-DT编码基因,利用基因拼接技术将其重组至p ET-20b质

【作者】

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李琦童欣怡蒋玉洁裴建军赵林果

【机构】

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南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心,南京林业大学化学工程学院

【出处】

：

林业工程学报

【发表日期】

：

2020年4期

【关键词】

：

全细胞催化剂 pelB信号肽 β⁃木糖苷酶三七皂苷R1 人参皂苷RG1 whole cell catalystpelB signal peptideβ-xyl

【基金项目】

：

国家重点研发计划(2016YFD0600805),南京林业大学大学生创新训练计划(201910298081Y)

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设计带有EcoRV和XhoI酶切位点的上下游引物PCR扩增嗜热菌Dictyoglomus thermophilum DSM 3960的GH39家族的β-木糖苷酶Xln-DT编码基因,利用基因拼接技术将其重组至p ET-20b质粒中pelB信号肽基因的下游,重组质粒转化大肠杆菌表达宿主Escherichia coli BL21,构建分泌融合表达型基因工程菌pelB-Xln-DT。经异苯基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,pelB-Xln-DT酶活为2.1 U/m L。粗酶液pelB-Xln-DT的最适温度为85℃

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