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目的：用噬菌体呈现技术结合体外致敏法构建了人源单链抗体库，并用大肠癌相关抗原ＣＡＨｂ３筛选出抗大肠癌噬菌体抗体克隆ＥＬ５Ｄ、ＥＬ６Ｄ和Ｃａ１２，测定３个克隆的核苷酸序列，并研究其免疫活性。方法：采用抗体克隆扩增、测序分析、免疫组化法测定活性。结果：抗体基因插入片段分别为２２０、５００、５００ｂｐ。测序结果表明，ＥＬ６Ｄ和Ｃａ１２属ＶＨ５ＤＪＨ４，仅为ＶＨ结构亚单位，而ＥＬ５Ｄ属Ｖκ的Ｊκ１，仅为ＦＲ３ＣＤＲ３ＦＲ４结构。三者均能与人结直肠癌细胞和组织反应，与其亲本鼠源单抗Ｈｂ３的结合特性一致。３个抗体克隆已列入国际基因库，序号为ＡＦ０５１１６５ＡＦ０５１１６７。结论：短的人源抗体片段具有潜在临床应用价值。