【摘 要】
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目的探索提取头孢菌素C产生菌顶头孢霉基因组DNA的方法.方法采用氯化苄法、液氮研磨法和酶裂解法.结果较其他两种方法比,氯化苄法提取效果好.当提取液pH值为9.0～10.0、EDTA浓
【机 构】
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沈阳药科大学制药工程学院,上海医药工业研究院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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目的探索提取头孢菌素C产生菌顶头孢霉基因组DNA的方法.方法采用氯化苄法、液氮研磨法和酶裂解法.结果较其他两种方法比,氯化苄法提取效果好.当提取液pH值为9.0～10.0、EDTA浓度为120 mmol·L-1时,所得的顶头孢霉染色体DNA的质量和数量均较理想,每克(湿重)顶头孢霉菌丝体能得到96μg的染色体DNA.常规琼脂糖凝胶电泳分析,其DNA片断大于23 kb.结论该分离方法获得的染色体DNA质量较高,可进行限制性内切酶酶解并适合后续特定基因的PCR扩增反应.
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