【摘 要】
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目的探究肝癌细胞分泌的外泌体中长链非编码RNA(long intergenic non-coding RNA)LINC ROR对巨噬细胞功能的调节作用。方法差速离心分离得到肝癌细胞PLC/PRF/5上清中的外泌体
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目(No.81600456)资助
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目的探究肝癌细胞分泌的外泌体中长链非编码RNA(long intergenic non-coding RNA)LINC ROR对巨噬细胞功能的调节作用。方法差速离心分离得到肝癌细胞PLC/PRF/5上清中的外泌体。电镜和纳米颗粒追踪分析仪检测外泌体形态特征和粒径分布。激光共聚焦荧光显微镜观测外泌体与巨噬细胞的空间相对位置。实时荧光定量PCR技术检测LINC ROR在外泌体中的表达水平。ELISA法检测巨噬细胞中LINC ROR小干扰RNA(siRNA)基因沉默后在脂多糖刺激下促炎症因子白细胞介素(IL)-1β的表达水平。结果肝癌细胞分泌的外泌体呈圆状,直径为100 nm左右,同时观测到巨噬细胞能接收肝癌细胞来源的外泌体。相对于正常肝细胞来源的外泌体,肝癌细胞PLC/PRF/5来源的外泌体中高表达LINC ROR。巨噬细胞中LINC ROR基因沉默后,在脂多糖诱导的炎症反应下,巨噬细胞促炎症因子IL-1β的表达水平明显增强。结论肝癌细胞分泌的外泌体中LINC ROR能对邻近巨噬细胞的炎症反应产生调控作用。
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