观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血小板源性生长因子(PDGF)在基质金属蛋白酶(MMP)9和(或)MMP2基因敲除小鼠中促进血管内膜增生的情况，并探讨其作用机制。
方法将C57BL/6N小鼠按随机区组法分为对照组、MMP9基因敲除(MMP9－/－)组、MMP2基因敲除(MMP2－/－)组和MMP9/2基因敲除(MMP9/2－/－)组，每组10只小鼠。取对照组小鼠2只，将其股动脉线性损伤，逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α和PDGF-bb的mRNA表达水平，Western blot法检测MMP9和MMP2的蛋白表达水平，用Odssey图像分析软件测得的蛋白条带灰度值；另取2只对照组小鼠，一只在其血管内膜损伤周围注射外源性TNF-α(5 ng/ml，0.10 ml)、TNF-α(0.05 ml)＋MMP抑制剂SB-3CT (0.50 ng/ml，0.05 ml)，另一只注射PDGF-bb(10 ng/ml，0.10 ml)、PDGF-bb(0.05 ml)＋SB-3CT(0.05 ml)，观察损伤后2和4周小鼠血管内膜增生情况。MMP9/2－/－组小鼠股动脉内膜线性损伤后2和4周观察其内膜增生情况。MMP2－/－组小鼠股动脉内膜损伤后，在其损伤周围注射TNF-α 0.1 ml，MMP9－/－组小鼠损伤血管内膜周围则注射PDGF-bb 0.1 ml，观察各组小鼠血管内膜增生情况。采用Elastica-van Gieson染色法观察小鼠损伤后股动脉内膜增生情况，SigmaPlot测量内膜和中膜面积，并计算其比值。最后，取MMP9－/－组和MMP2－/－组小鼠股动脉血管平滑肌细胞(VSMC)培养基，分别给予TNF-α和PDGF-bb干预，进行迁移和增殖实验，测定迁移和增殖细胞数。
结果(1)血管内膜损伤后TNF-α、PDGF、MMP9和MMP2于不同阶段被诱导：对照组小鼠TNF-α、PDGF-bb mRNA表达在血管内膜损伤后1 d达高峰，MMP9和MMP2的蛋白表达水平在血管内膜损伤后7和28 d表达水平较高。(2)TNF-α、PDGF-bb分别于血管内膜损伤后不同阶段诱导内膜增生：血管内膜损伤2周时，TNF-α干预较未干预的对照组小鼠血管内膜增生更为明显，内膜比值分别为2.21±0.05和1.55±0.03(P＝0.02)。血管内膜损伤4周时，PDGF-bb干预较未干预的对照组小鼠血管内膜增生更为明显，内膜比值分别为2.60±0.07和1.89±0.04(P＝0.03)。(3)血管内膜损伤后不同阶段MMP9和MMP2与血管内膜增生的关系：血管内膜损伤2周时，对照组小鼠血管内膜增生较MMP9/2－/－组明显，内膜比值分别为1.63±0.05和0.46±0.01(P＝0.008)。血管内膜损伤4周时，对照组小鼠血管内膜增生较MMP9/2－/－组明显，内膜比值分别为2.24±0.06和0.51±0.01(P＝0.005)。(4)TNF-α促进MMP2－/－组小鼠血管内膜增生而PDGF-bb促进MMP9－/－组小鼠血管内膜增生：血管内膜损伤2周时，TNF-α干预与未干预的MMP2－/－组小鼠比较，血管内膜增生较为明显，内膜比值分别为1.73±0.05和1.23±0.03(P＝0.02)。血管内膜损伤4周时，PDGF-bb干预与未干预的MMP9－/－组小鼠比较，血管内膜增生较为明显，内膜比值分别为2.32±0.06和1.35±0.03(P＝0.03)。(5)MMP9缺乏抑制TNF-α诱导的VSMC迁移而MMP2缺乏抑制PDGF诱导的VSMC增殖：MMP9－/－组抑制TNF-α诱导的细胞迁移较对照组明显，迁移细胞相对数分别为1.45±0.03和2.16±0.04(P＝0.03)，MMP2－/－组抑制PDGF诱导细胞增殖较对照组明显，增殖细胞相对数分别为1.15±0.02和1.82±0.04(P＝0.03)。
结论血管内膜损伤后的前2周，主要由TNF-α诱导MMP9表达、促进VSMC迁移，而后2周，主要由PDGF诱导MMP2表达、促进VSMC增殖，故TNF-α-MMP9-VSMC迁移轴和PDGF-MMP2-VSMC增殖轴共同组成了内膜的增生机制。