【摘 要】
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油菜素内酯具有促进植物生长、增加产量和提高植物抗逆性等作用.本研究以中草药金龙胆草(Conyza blinii)为研究对象,克隆分析其油菜素内酯合成途径C-23羟化酶(CYP90C1/ROT3)
【机 构】
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攀枝花学院生物与化学工程学院,攀枝花,617000
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油菜素内酯具有促进植物生长、增加产量和提高植物抗逆性等作用.本研究以中草药金龙胆草(Conyza blinii)为研究对象,克隆分析其油菜素内酯合成途径C-23羟化酶(CYP90C1/ROT3)基因.根据金龙胆草叶片转录组数据,克隆获得了一条全长1 512 bp的ROT3基因cDNA序列,编码504个氨基酸,命名为CbROT3,GenBank登录号为KX907782;通过生物信息学工具分析其分子特征表明CbROT3氨基酸序列与向日葵(Helianthus annuus)ROT3的相似性达87％,系统进化树分析结果也与之相吻合;该基因蛋白相对分子质量为57.51kD,等电点为7.59,为亲水性蛋白,具有一个跨膜结构,无信号肽序列;摸索其原核表达条件,发现在22℃、0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导条件下可获得最大量的可溶性目的蛋白.本研究结果对提高金龙胆草内源油菜素内酯含量,调控金龙胆草生长发育和增加金龙胆草抗逆性提供理论依据.
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