目的建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱(RP-HPLC)测定法,方法以替硝唑为内标,血浆样品处理采用30%硫酸锌沉淀法,色谱分析采用日本分光JASCO-1500系列高效液相色谱仪,Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相组成为甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液=20∶80(v/v),流速为0.8 mL.min-1,进样量为20μl,柱温30℃,紫外检测波长236 nm,灵敏度AUFs=0.02,以峰面积、内标法定量。结果本法在万古霉素浓度(χ)为5.0~80 mg.L-1间呈良好线性关系,相关系数r=0.998 5(n=5),血浆最低检测浓度为2.5 mg.L-1(S/N≥3),日内、日间RSD<10%,稳定性考察RSD<10%。结论此法采血量少,快速简便、灵敏度和准确度高,适合临床常规血药浓度监测及实验课题研究。