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目的 利用基因工程技术克隆组织纤溶酶原激活物(t-PA)基因并构建一种无细胞毒性、不激活原癌基因的真核表达的pcDNA3．1t-PA质粒载体。方法 采用高效Trizol试剂快速从人肺组织中提取RNA，RT-PCR获得t-PA cDNA，扩增、纯化、回收t-PA基因片段并将质粒pcDNA3．1和t-PA基因片段分别双酶切，前者纯化回收大片段，后者纯化回收1．9kb片段，再将回收的pcDNA3．1大片段与t-PA基因片段(1．9kb)重组。对重组pcDNA3．1t-PA质粒进行单酶切和双酶切鉴定，并测序。结果