【摘 要】
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目的构建丝状支原体丝状亚种SC型LppQ N-端基因表达载体,并进行表达产物的纯化及免疫原性检测.方法利用PCR方法在体外定点突变丝状支原体丝状亚种SC型HVRI-X株编码色氨酸的基
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室,吉林农业大学动物科技学院
【基金项目】
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国家科技攻关计划项目(2002BA518A04).
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目的构建丝状支原体丝状亚种SC型LppQ N-端基因表达载体,并进行表达产物的纯化及免疫原性检测.方法利用PCR方法在体外定点突变丝状支原体丝状亚种SC型HVRI-X株编码色氨酸的基因(TGA突变为TGG),构建表达载体,使其能在大肠杆菌中大量表达,并对表达产物进行纯化和免疫原性检测.结果表达产物约占菌体总蛋白的53.7%,经Western blot和ELISA检测,表达蛋白具有良好的免疫原性.结论已成功表达了具有免疫原性的LppQ重组表达蛋白,可以作为诊断抗原用于血清学检测.
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