【摘 要】
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排斥反应仍然是阻碍小肠移植成功的主要障碍,其机理、诊断及治疗均有待进一步研究.目前建立逆转录多聚合酶链反应(RT-PCR)方法,观察排斥反应期移植肠IL-2、IFN-Υ、穿孔素、
【机 构】
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南京大学医学院临床学院,南京军区南京总医院全军普通外科研究所,江苏南京,210002南京军区医学研究所分子遗传研究室,江苏南京,210002;
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排斥反应仍然是阻碍小肠移植成功的主要障碍,其机理、诊断及治疗均有待进一步研究.目前建立逆转录多聚合酶链反应(RT-PCR)方法,观察排斥反应期移植肠IL-2、IFN-Υ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录变化.取大鼠移植肠标本提取总RNA,并进行RT-PCR检测IL-2、IFN-Υ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录,PCR产物以内参基因β-actin为内对照,应用SX-100生物影像分析系统进行半定量分析.结果显示RT-PCR无非特异性扩增,β-actin和各目的基因扩增的模板投入量与反应循环数均在指数增长范围内,且扩增效率相同,所以各目的基因mRNA的定量可用β-actin mRNA作为内标来校正.排斥反应期移植肠IL-2、IFN-Υ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录显著升高,结果表明RT-PCR检测移植肠IL-2、IFN-Υ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录可能成为早期排斥反应诊断的特异敏感手段.
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