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目的
以负载转化生长因子β3(TGF-β3)的藻酸钙凝胶(CAG)复合脂肪间充质干细胞(ADSCs)构建的组织工程软骨,探讨其修复兔关节软骨缺损的效果。
方法取新西兰白兔皮下脂肪,分离培养得到ADSCs。暴露股骨踝关节面,并做全层关节软骨缺损模型。将ADSCs种植到负载TGF-β3的CAG支架材料上,构建组织工程软骨,移植到兔关节软骨缺损处。实验分为对照组(向关节腔内注射无菌等渗盐水)、CAG组(注射CAG)、ADSCs+CAG组(注射负载ADSCs的CAG)、TGF-β3+CAG组(注射负载TGF-β3的CAG)、TGF-β3+ADSCs+CAG组(注射负载TGF-β3、ADSCs的CAG),每组10只。于术后12周,分别采用大体观察、HE染色、番红-O及Ⅱ型胶原免疫组化染色等方法观察关节软骨缺损的修复情况,并用国际关节软骨修复协会(ICRS)制订的评分法进行组织学评分。
结果TGF-β3+ADSCs+CAG组的缺损软骨修复效果明显优于其他组,其新生组织与周围正常组织紧密结合,并且细胞外基质的分泌情况与正常组织相似。对照组、CAG组、ADSCs+CAG组、TGF-β3+CAG组和TGF-β3+ADSCs+CAG组的ICRS评分分别为(7.06±0.18)分、(7.15±0.23)分、(7.45±0.25)分、(7.47±0.24)分和(15.78±0.24)分,TGF-β3+ADSCs+CAG组明显优于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论负载TGF-β3、ADSCs的CAG修复兔关节软骨缺损具有较好的效果,而且是一种结构性的修复。