【摘 要】
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目的 采用油酸诱导HepG2细胞发生脂变,建立脂肪变性细胞模型,观察SIRT1/UCP2通路在脂肪变性HepG2细胞能量代谢中的调控机制.方法 采用含有2 mmol/L油酸的DMEM培养基诱导HepG2
【机 构】
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暨南大学医学院,广东省中医院大学城医院,暨南大学附属第一医院
【基金项目】
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国家自然科学基金;中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金;广东省医学科研基金;广东省中医药局项目;暨南大学第一临床医学院科研培育专项基金
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目的 采用油酸诱导HepG2细胞发生脂变,建立脂肪变性细胞模型,观察SIRT1/UCP2通路在脂肪变性HepG2细胞能量代谢中的调控机制.方法 采用含有2 mmol/L油酸的DMEM培养基诱导HepG2细胞24 h后,建立脂肪变性HepG2细胞模型,并设置对照组比较.以油红O染色观察细胞内脂滴形成状况,并用全自动生化仪检测细胞上清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量和细胞内甘油三酯(TG)含量;采用流式细胞仪测定线粒体膜电位的改变,采用磷钼酸比色试剂盒测定细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量,运用Western印迹法检测各组细胞SIRT1和UCP2蛋白的表达.结果 与对照组比较,模型组细胞内橘红色脂滴大量形成,且TG含量明显升高(P＜0.01),线粒体膜电位及细胞内ATP含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01),SIRT1蛋白表达均显著降低(P＜0.05),UCP2蛋白表达显著升高(P＜0.01).结论 油酸诱导的脂肪变性HepG2细胞模型可以出现脂质代谢紊乱和线粒体能量代谢失衡,其机制可能与细胞内SIRT1/UCP2通路的激活有关.
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