手掌参中赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白基因的表达、纯化及鉴定

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根据已筛选到的手掌参(Gymnadnia conopsea)中赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白部分cDNA序列,设计带有EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的引物,对编码区全长(gcgasa)及信号肽缺失的片段(Δgcgasa)进行扩增,获得大小约319和238bp的片段。克隆到表达载体pET-32a,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),经1mmol/LIPTG诱导后,在分子量约26.0和25.2kD出现融合蛋白条带。SDS-PAGE和细胞透射电镜结果表明:含有信号肽的外源基因在大肠
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