论文部分内容阅读
目的:观察条件反射箱应激对哮喘小鼠气道上皮细胞的破坏及影响,以及气道上皮细胞凋亡的规律性变化与气道炎症的相关性,探讨疏肝理肺方治疗情志哮喘的可能机制.方法:实验于2005-03/12在江西中医学院附属医院临床检验中心完成.选择10月龄昆明种小鼠120只,采用随机数字表法随机分为4组:正常对照组、哮喘模型组和心理应激哮喘组以及心理应激哮喘中药组.每组30只.①分组后第1天,正常对照组腹腔注射生理盐水0.8 mL,1次/d;哮喘模型组、心理应激哮喘组、心理应激哮喘中药组分别腹腔注射致敏液(含卵蛋白100mg、氢氧化铝100mg、百日咳杆菌5×109个)0.8 mL,1次/d.②2周后哮喘模型组、心理应激哮喘组、心理应激哮喘中药组均用10 g/L卵蛋白、正常对照组给予生理盐水雾化吸入1次/d.③雾化吸入5 d,正常对照组、哮喘模型组、心理应激哮喘组开始给予生理盐水灌胃,心理应激哮喘中药组开始给予疏肝理肺汤(由小青龙汤与四逆散合方制成浓缩液,由江西中医学院附属医院制剂室提供)浓缩液12.5 mL/(kg·d),至造模结束.④灌胃3 d后,心理应激哮喘组、心理应激哮喘中药组每天1次条件反射箱加以应激,对1只鼠进行电击,电压20 V,电流强度＜1 mA,持续时间5 s,间隔时间15 s,共60次,总时间为20 min.同时,将一只进行情绪应激的小鼠放入另一小室中,不给电击,但电击鼠的反应如跑动、跳跃、嘶叫等给情绪应激小鼠的听觉、视觉和嗅觉以强烈刺激,条件反射箱应激1次/d,连续1周.结束取血.⑤观察小鼠的哮喘表现和呼吸频率、外周血细胞计数、血清、支气管灌洗液中白细胞介素4含量和TFAR19水平的变化.结果:120只小鼠全部进入结果分析.①各组小鼠哮喘表现及呼吸频率变化:在整个激发阶段,正常对照组无特殊,心理应激哮喘组较哮喘模型组哮喘特征表现显著,呼吸频率明显增加(P＜0.05),并明显表现出不安、惊恐等的行为特点;心理应激哮喘中药组出现上述症状时间后延,程度明显减轻,呼吸频率显著减少(P＜0.05).②各组小鼠外周血嗜酸性粒细胞计数:与正常对照组相比,哮喘模型组、心理应激哮喘组嗜酸性粒细胞计数明显升高((0.15±0.16)%,(0.31±0.62)%,(0.38±1.51)%,P＜0.05);与心理应激哮喘组相比,心理应激哮喘中药组嗜酸性粒细胞计数明显降低((0.22±0.58)%,P＜0.05).③各组小鼠血清、支气管肺泡灌洗液中白细胞介素4和TFAR19的含量:与正常对照组相比,哮喘模型组、心理应激哮喘组白细胞介素4和TFAR19含量明显升高(哮喘模型组P＜0.05,心理应激哮喘组P＜0.01);与心理应激哮喘组相比,心理应激哮喘中药组白细胞介素4和TFAR19含量明显降低(P＜0.05).结论:情绪应激通过神经内分泌免疫网络而影响气道上皮细胞的功能,且通过激活炎症细胞释放炎性介质,影响免疫状态,促发哮喘.疏肝理肺方具抗炎、抑制介质释放,改变细胞凋亡状况,调节应激反应作用,从而对气道上皮细胞的损伤起保护作用.