转化生长因子-β1对鼠肝细胞凋亡调控作用的研究

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目的:本研究旨在明确正常肝和肝硬化肝细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)的作用及其与凋亡的关系. 方法:通过50%四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱发BALB/c小鼠形成肝硬化模型;应用改良的胶原酶原位灌注法分离正常和肝硬化小鼠的肝细胞;利用1.5%的琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带,并应用DNA荧光染料Hoechst 33342 对正常肝细胞进行染色,以检测TGF-β1诱导的凋亡. 结果:以胶原酶原位二步灌流法分离肝细胞的活率为95.2%.正常肝细胞予以TGF-β1处理后,应用1.5%的琼脂糖凝胶电泳可以发现具有凋亡特征的梯形条带.硬化肝细胞则很少出现梯形条带.经TGF-β1处理的正常肝细胞应用Hoechst染色发现,其凋亡率明显高于未处理组. 结论:肝硬化肝细胞不能像正常肝细胞那样发生TGF-β1诱导的凋亡,提示肝硬化肝细胞的抑制性生长调控机制已经受损.
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