目的:采用高效液相色谱法建立酒苁蓉的特征图谱,并同时测定5个苯乙醇苷类成分的含量。方法:以松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和2′-乙酰基毛蕊花糖苷为对照,采用Agilent EclipseXDB-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以甲醇为流动相A,0.1%甲酸为流动相B,梯度洗脱（0～15min,15%A→21%A;15～20 min,21%A→25%A;20～70 min,25%A→43%A）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长为330 nm,柱温35℃。结果:建立酒苁蓉特征图谱,70 min内酒苁蓉的主要色谱峰能够达到完全分离,同时标定5个苯乙醇苷类成分,对15批饮片中的5个成分进行含量测定。松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖和2′-乙酰基毛蕊花糖苷的质量浓度分别在10.05～1 005μg·mL^-1（r=0.999 9,n=6）、2.02～202μg·mL^-1（r=0.999 9,n=6）、2.04～204μg·mL^-1（r=0.999 9,n=6）、2.01～201μg·mL^-1（r=0.999 9,n=6）、2.02～202μg·mL^-1（r=0.999 9,n=6）范围内线性关系良好,方法的平均回收率（n=6）分别为99.8%（RSD=0.30%）、99.5%（RSD=1.6%）、100.2%（RSD=0.44%）、99.5%（RSD=0.53%）、99.8%（RSD=0.36%）;15批酒苁蓉中上述5个成分含量分别为0.20%～7.38%、0.03%～0.20%、0.03%～0.72%、0.03%～0.75%、0.03%～0.07%。结论:该方法操作简单,重复性好,并能同时测定5个苯乙醇苷类成分含量,具备定性定量双重作用,可为酒苁蓉的质量标准研究提供更加全面的依据。